比色法和吸光光度法

人眼可看到可見(jiàn)光的波長(zhǎng)范圍為400nm～750nm，按波長(zhǎng)從長(zhǎng)到短排列，依次為紅、橙、黃、綠、青、藍(lán)、紫。其中紅光的波長(zhǎng)范圍為650nm～750nm；紫光的波長(zhǎng)范圍為400nm～450nm。

物質(zhì)呈現(xiàn)的顏色與光有著密切的關(guān)系。物質(zhì)所以呈現(xiàn)不同的顏色是由于該物質(zhì)對(duì)光具有選擇性吸收的原故。

當(dāng)一束白光(混合光)通過(guò)某溶液時(shí)，如果該溶液對(duì)可見(jiàn)光區(qū)各種波長(zhǎng)的光都沒(méi)有吸收，即入射光全部通過(guò)溶液，則該溶液呈無(wú)色透明狀。當(dāng)該溶液對(duì)可見(jiàn)光區(qū)各種波長(zhǎng)的光全部吸收時(shí)．則該溶液顯黑色。如某溶液對(duì)可見(jiàn)光區(qū)某種波長(zhǎng)的光選擇性的吸收，則該溶被即呈現(xiàn)出被吸收波長(zhǎng)光的互補(bǔ)色光的顏色。例如當(dāng)一束白光通過(guò)KMnO₄溶液時(shí)，該溶液選擇性的吸收了綠色波長(zhǎng)的光，而將其它的色光兩兩互補(bǔ)成白光而通過(guò)去，只剩下紫紅色光，未被互補(bǔ)，所以KMnO₄溶液呈現(xiàn)紫色。

人們發(fā)現(xiàn)含有有色物質(zhì)的溶液濃度改變時(shí)，溶液顏色的深淺度也就隨著改變。溶液越濃顏色愈深，溶液越稀顏色愈淺。因此可以利用比較溶液顏色深淺的方法來(lái)確定溶液中有色物質(zhì)的含量，這種方法就稱(chēng)為比色分析法。用眼睛觀察比較溶液顏色深淺來(lái)確定物質(zhì)含量的分析方法稱(chēng)為目視比色法。利用光電效應(yīng)測(cè)量通過(guò)有色溶液后透過(guò)光的強(qiáng)度，求得被測(cè)物質(zhì)含量的方法稱(chēng)為光電比色法。分光光度法是以棱鏡或光柵為分光器，并用狹縫分出很窄的一條波長(zhǎng)的光，并同樣測(cè)量透過(guò)光的強(qiáng)度來(lái)求得被測(cè)物質(zhì)的含量；由于光的波長(zhǎng)范圍窄，其測(cè)定的靈敏度，選擇性和準(zhǔn)確度都比比色法高。