文章詳情
薄層層析法測定果醬中苯甲酸、山梨酸的含量
日期：2025-07-11 03:40
瀏覽次數(shù)：2407
摘要：
薄層層析法測定果醬中苯甲酸、山梨酸的含量
一、原理
先將樣品酸化，然后用乙醚提取苯甲酸和山梨酸。再將提取液濃縮，點(diǎn)樣于聚酰胺板上，經(jīng)展開、顯色后，并與標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)比較可進(jìn)行概略定量。
二、試劑
6mol/L HCl(1:1) 乙醚：除去過氧化物
4%NaCl 酸性溶液 無水乙醇
無水硫酸鈉 聚酰胺粉：200目
展開劑：正丁醇：氨水：無水乙醇（7+1+2）
異丙醇：氨水：無水乙醇（7+1+2）
顯色劑：0.04%溴甲酚紫（用50%的乙醇配制，并用0.1mol/L NaOH調(diào)至PH=8）
苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)液（2mg/mL）：精密稱取0.2000g苯甲酸，用少量乙醇溶解后移入100mL容量瓶中定容。
山梨酸標(biāo)準(zhǔn)液（2mg/mL）：精密稱取0.2000g山梨酸，用少量乙醇溶解后移入100mL容量瓶中定容。
三、儀器
玻璃板（10×18cm） 微量注射器（10uL,20uL） 層析缸 噴霧器 吹風(fēng)機(jī)
四、測定操作
1、樣品處理
稱取25g混合均勻的樣品，置于100mL分液漏斗中加0.5mLHCl酸化，用15、10mL乙醚提取兩次，每次振搖1分鐘，靜置分層后將醚層分出，合并乙醚提取液。用3mL 4%NaCl酸性溶液洗滌兩次，棄去水層，靜置15分鐘，再分離出水層，將乙醚提取液通過無水硫酸鈉移入25mL容量瓶中，加乙醚定容。吸取10.00mL乙醚提取液分兩次置于10ml具塞離心管中，在約40℃水浴上揮干，加入0.1mL乙醇溶解殘?jiān)?，備用?/span>
2、聚酰胺薄層板的制備
稱取1.6g聚酰胺粉，加0.4g可溶性淀粉，加約15mL水，研磨3分鐘，在10×20cm玻璃板上使其均勻即涂成0.25-0.30mm厚的薄層，室溫下干燥1小時，置于烘箱內(nèi)80℃干燥1小時，取出后置干燥器中備用。
3、點(diǎn)樣
在距薄層板下端2cm的基線上，用微量注射器點(diǎn)1uL、2uL樣品液，同時分別點(diǎn)1uL、2uL苯甲酸、山梨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，點(diǎn)間距1.5cm。
4、展開顯色
將點(diǎn)樣后的薄層板放入預(yù)先盛有展開劑的展開槽中，展開槽內(nèi)壁貼有濾紙，待溶劑前沿上展至10cm,取出揮干，噴顯色劑，斑點(diǎn)黃色，背景藍(lán)色。
5、定性與定量
把樣品斑點(diǎn)與標(biāo)準(zhǔn)斑點(diǎn)比較，若與標(biāo)準(zhǔn)斑點(diǎn)同一位置線上出現(xiàn)樣品斑點(diǎn)，說明樣液中存在苯甲酸或山梨酸。然后根據(jù)斑點(diǎn)的面積大小及顏色深淺確定樣品點(diǎn)的苯甲酸、山梨酸的含量，再進(jìn)行計(jì)算。
五、計(jì)算
樣品中苯甲酸的含量（g/kg）=
(山梨酸)
A——點(diǎn)樣用樣液中苯甲酸（山梨酸）的含量mg
M——稱取的樣品質(zhì)量g
V1——溶解殘?jiān)鼤r加乙醇體積mL
V2——點(diǎn)樣的體積mL
